2023-210
一些細胞和組織可在懸浮狀態下生長,但相當一部分哺乳動物細胞需要表面貼壁。因此,用于提供細胞體外培養環境的培養瓶、培養板和培養皿除了具有良好的透明度和無毒、無菌外，還需經表面改性處理使之能夠貼壁、分裂和生長。細胞培養瓶瓶體設計合理，表面TC處理，適用于實驗室中等規模細胞和組織培養。細胞培養瓶是實驗室進行長時間細胞培養、大量細胞擴增和防污染的合適培養器皿。未處理表面適用于懸浮細胞培養；TC處理表面，經過處理后聚苯乙烯表面具有較好親水性，適用于常見細胞系的粘附和伸展；超親水處理表面...
查看更多2023-19
凋亡（Apoptosis），或者說程序性細胞死亡（Programmedcelldeath），是細胞內建的防御機制之一，在生物的正常發育及疾病抵御中起到重要的作用。凋亡過程與通路的異常，會導致多種疾病，包括腫瘤。目前至少有十數種檢測細胞凋亡的方法，從大框架上講，可以劃分為基于細胞形態、生物學功能和生化標記三大類。然而，每一種方法都有其優缺點，且并非所有的方法對每一位實驗人員來說都是實用的。細胞凋亡（Apoptosis）是細胞程序性死亡（Programmedcelldeath）的...
查看更多2022-128
原代培養的細胞，來源于胚胎、組織器官和外周血，通過特殊的分離方法制備，稱為原代細胞。初步分離得到的細胞具有與體內細胞相似的生物學特性，是研究生進行與物體相關的生命活動的理想材料。原代細胞分離培養是從體內取出人/小鼠模型動物特異性細胞，用胰蛋白酶和螯合劑(EDTA)處理，分散成單細胞，并在合適的培養基中培養，使得細胞能夠存活、生長和繁殖的過程。原代培養是指細胞、組織和器官直接從體內取出后立即進行培養。此時的細胞保持了原細胞的基本性質，如果是正常細胞，則仍保留二倍體數。但實際上，...
查看更多2022-119
成纖維細胞比心肌細胞更容易貼壁，具有分裂增殖能力。差異貼壁后，原代心肌細胞間中仍有少數成纖維細胞混雜，如果處理不當，很容易長成優勢細胞。溴脫氧尿苷(BrdU)可以干擾細胞有絲分裂，因此BrdU常規用于抑制成纖維細胞的生長。但如果用胎牛血清培養細胞，由于胎牛血清含有很多促有絲分裂因子，BrdU很難抑制成纖維細胞的生長。使用小牛血清可以克服這種現象，獲得90%以上的心肌細胞。觀察原代心肌細胞間形態時，接種密度低，貼壁心肌細胞數量減少。為了防止存活的心肌細胞隨著液體的更換而被丟棄，...
查看更多2022-1012
細胞外泌體是細胞分泌的大小約為30-150nm的納米物質，是細胞外囊泡的一類，結構類似于細胞，磷脂雙分子層表面具有多種特異性膜蛋白，內部搭載著多種蛋白質、RNA、DNA等重要生物信號物質，廣泛分布于血液、尿液、腦脊液、唾液、乳汁、膽汁等各種體液中。外泌體的來源細胞種類非常豐富，幾乎在人體血液、尿液、母乳和唾液等多種體液中都能發現它的蹤跡。可傳遞包括DNA、RNA、miRNA、脂質和蛋白質在內的多種生物活性物質，同時保護包裹的內含物免受核酸酶和蛋白酶，以及外界壞境變化引起的降解...
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CellCountingKit-8（簡稱CCK-8）試劑可用于簡便而準確的細胞增殖和毒性分析。CCK-8&MTT方法比較方法優點缺點CCK-8法靈敏度高、不使用有機溶劑、檢測迅速、重復性好價格較MTT貴、CCK8試劑的顏色為淡紅色、與含酚紅的培養基顏色接近，容易漏加或多加MTT法價格便宜操作步驟較多，需要使用有機試劑，靈敏度不如CCK-8，多數需要配制，檢測時間長，細胞毒性較高一、原理：CCK-8是MTT的升級產品，其基本原理為：該試劑中含有WST-8【化學名：2-(2-甲氧...
查看更多2022-914
一、材料與儀器：大鼠、裂解緩沖液、濃蔗糖溶液、超速離心機、組織研磨器二、實驗步驟：1.配制裂解緩沖液和濃蔗糖溶液（PMSF在使用前添加），冰上放置。裂解緩沖液:①0.25mol/L蔗糖網織紅細胞標準緩沖液（RSB）②0.25mol/L蔗糖（超級純）③10mmol/Tris-HCl(pH7.4)④10mmol/LNaCl⑤3mmol/LMgCl2⑥1mmol/LDTT⑦0.5mmol/LPMSF(用前從溶于乙醇的100mmol/L貯存液中添加）濃蔗糖溶液:①2mol/L蔗糖RS...
查看更多2022-99
材料與儀器：細胞、TBS抽提緩沖液、離心管實驗步驟：步驟1：根據樣品類型，從下列方法中選一個作為步驟1進行操作。(1)細胞樣品①單層培養的細胞以用冰預冷的TBS將單層細胞洗滌2次，用刮棒把細胞刮入約0.5ml的TBS中，將細胞懸液轉移到冰浴的離心管中，用1mlTBS沖洗培養皿，并入離心管中的細胞懸液。于4℃以1500g離心10分鐘以收獲細胞。用5~10倍體積經冰預冷的TBS重懸細胞并再度離心。用TE(pH8.0）重懸細胞，使細胞密度為5x107細胞/ml，轉移至一個三角燒瓶中...
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