更新時間：2025-03-05
點擊次數：1699
本研究作者開發了一種由生姜衍生脂質制成的納米載體（GDNV），用于遞送阿霉素（Dox）治療結腸癌。作者研究發現，GDNV能被結腸癌細胞有效吸收，并在200μmol/l濃度下表現出優異的生物相容性，相比之下，陽離子脂質體會抑制細胞增殖并增加細胞凋亡。GDNV可高效負載Dox，且藥物釋放具有更好的pH依賴性。通過與靶向配體葉酸偶聯，GDNV可將Dox精準遞送至結腸26腫瘤，顯著增強化療效果。該研究展示了天然來源納米顆粒作為治療載體的潛力，有望減輕傳統合成納米顆粒的潛在問題。該研究最后被作者以題名為Edible Ginger-derived Nano-lipids Loaded with Doxorubicin as a Novel Drug-delivery Approach for Colon Cancer Therapy（IF=12.1 ，一區）發表在Molecular Therapy上，接下來小編帶大家一起看看這篇文章的主要研究成果。
1.GDNVs的制備與表征
本研究作者從生姜提取物中分離出大量納米顆粒，并利用透射電子顯微鏡（TEM）和原子力顯微鏡（AFM）鑒定其為納米顆粒。分析結果顯示，生姜納米顆粒富含磷脂酸（PA，占總脂質的47%）、二半乳糖二酰基甘油（15%）和單半乳糖二酰基甘油（27%）。這些脂質具有調控膜分裂、融合以及穩定脂質體的特性。通過脂質膜水化法，研究團隊成功將生姜脂質重新組裝為生姜衍生納米載體（GDNVs），分散度低且尺寸分布均勻。實驗發現，GDNVs的形成濃度為5μmol/l，且在256μmol/l的總脂質濃度下可獲得更穩定的尺寸分布。GDNVs在4℃下儲存25d后仍保持穩定，顯示出良好的應用潛力。這些結果表明，生姜脂質可大規模生產為穩定的納米載體，為天然來源納米藥物遞送系統提供了新的可能性。
2. GDNVs在結腸癌治療中的細胞攝取和生物安全性研究
本研究作者評估了生姜衍生納米載體（GDNVs）作為結腸癌治療載體的潛力。實驗發現，GDNVs在與Colon-26和HT-29細胞共孵育4h后，被細胞高效攝取。其內化主要通過吞噬作用實現，被細胞松弛素D顯著抑制。細胞毒性實驗顯示，GDNVs在高達200 μmol/l的濃度下對多種細胞的增殖和凋亡無顯著影響，而陽離子脂質體在較低濃度下（>20 μmol/l）即誘導顯著細胞毒性。此外，GDNVs在體內實驗中表現出良好的生物安全性：靜脈注射后未引起小鼠血清中促炎細胞因子水平的顯著變化，組織學分析未發現器官損傷，且在血液中未觀察到溶血現象。綜上，GDNVs在體外和體內均表現出低毒性，且能被結腸癌細胞高效攝取，具有作為結腸癌治療藥物載體的應用前景。
3. GDNVs用于阿霉素遞送：高效負載與pH依賴性釋放
本研究作者評估了生姜衍生納米載體（GDNVs）作為化療藥物阿霉素（Dox）遞送系統的潛力。通過超聲處理，GDNVs利用靜電作用將Dox包裹在生姜脂質雙層結構中，負載效率高達95.9%±0.26%（在生姜脂質濃度為100 μmol/l時）。透射電子顯微鏡（TEM）顯示，Dox-GDNVs呈近乎球形，粒徑約188 nm，zeta電位為-15.5 mV，與未負載藥物的GDNVs相似，這些特性有助于延長血液循環時間和增加腫瘤積累概率。Dox-GDNVs在4℃下儲存25d后仍保持穩定，且藥物負載能力不受影響。
此外，作者研究發現Dox-GDNVs在酸性環境中能夠快速釋放藥物，尤其在pH值為5.5時，釋放速度顯著加快。這種pH依賴性釋放特性使其能夠在腫瘤微環境中高效釋放藥物，減少藥物在正常組織中的分布，從而降低化療副作用，如白細胞減少、血小板減少和胃腸道毒性。綜上得出，GDNVs能夠高效負載Dox并實現pH依賴性釋放，有望成為化療藥物遞送的有效載體。
4. Dox-GDNVs的體外抗腫瘤活性：凋亡誘導與藥物釋放特性
本研究作者通過體外實驗評估了游離阿霉素（Dox）和Dox-GDNVs（生姜衍生納米載體負載的阿霉素）對Colon-26和HT-29結腸癌細胞的抗腫瘤活性，主要通過檢測細胞凋亡來實現。實驗中，細胞分別接受3.25、6.5和13 μmol/l的游離Dox和Dox-GDNVs處理8h，隨后使用annexin V-FITC/PI試劑盒進行流式細胞術檢測。結果顯示，游離Dox和Dox-GDNVs均能以濃度依賴性方式降低細胞存活率，但游離Dox的細胞毒性更強，表明其通過被動擴散快速進入細胞核發揮抗腫瘤作用。而Dox-GDNVs表現出時間依賴性釋放特性，延緩藥物釋放，產生持續細胞毒性作用。
進一步通過電細胞底物阻抗傳感（ECIS）技術實時監測凋亡，發現Dox-GDNVs處理的Caco2-BBE細胞單層電阻呈濃度依賴性下降，而較低濃度的游離Dox即可顯著降低電阻。此外，通過檢測凋亡標志物裂解的半胱天冬酶-3/7，證實了Dox-GDNVs誘導的細胞凋亡。實驗表明，Dox-GDNVs在體外具有良好的抗腫瘤活性，且通過納米載體遞送可實現藥物的緩釋和持續作用。
5. Dox-FA-GDNVs的體內腫瘤靶向與抗腫瘤效果研究
本研究通過非侵入性成像技術評估了阿霉素-葉酸修飾的生姜衍生納米載體（Dox-FA-GDNVs）的體內腫瘤靶向能力和抗腫瘤效果。實驗中，DiR標記的GDNVs和FA-GDNVs被靜脈注射到小鼠體內，結果顯示DiR熒光在多個器官中均有分布，其中肝臟熒光強度最高。FA-GDNVs在腫瘤中的熒光強度比普通GDNVs高約2.8倍，表明其具有主動靶向腫瘤的能力。此外，FA-GDNVs在小鼠體內循環48h后仍保持穩定，為藥物在腫瘤部位的積累提供了更長時間窗口。
在抗腫瘤實驗中，攜帶Colon-26腫瘤的小鼠被分為四組（生理鹽水、游離阿霉素、FA-GDNVs和Dox-FA-GDNVs）進行治療。結果顯示，Dox-FA-GDNVs顯著抑制了腫瘤生長，效果優于游離阿霉素。組織學分析也證實，Dox-FA-GDNVs處理的腫瘤切片中癌細胞數量顯著減少。這些結果表明，葉酸修飾的GDNVs能夠增強阿霉素的抗腫瘤效果，同時減少藥物對正常組織的毒性。
6.Dox-FA-GDNVs的抗腫瘤效果：基于Ki67和TUNEL實驗的體內評估
Dox-FA-GDNVs對植入的Colon-26細胞的抗腫瘤效果還通過免疫組化檢測細胞增殖標志物Ki67和TUNEL實驗進行了評估。結果顯示，與接受游離阿霉素治療的小鼠腫瘤相比，接受Dox-FA-GDNVs治療的小鼠腫瘤中Ki67陽性細胞的比例顯著降低。在游離阿霉素治療的小鼠腫瘤中，Ki67陽性細胞的平均比例為64.67%，而接Dox-FA-GDNVs治療的腫瘤中，相應比例僅為10%。
TUNEL實驗表明，在接受生理鹽水或FA-GDNVs治療的小鼠腫瘤中，TUNEL陽性（綠色）凋亡細胞幾乎無法檢測到（分別為4.7%和3.3%）。而在接受游離阿霉素治療的小鼠腫瘤中，凋亡細胞可以被檢測到（占18%），并且在Dox-FA-GDNVs治療的小鼠腫瘤中更為顯著，凋亡細胞占所有癌細胞的43.3%。這些結果證實，Dox-FA-GDNVs比游離阿霉素具有更強的抗腫瘤效果。
7. 葉酸修飾GDNVs的體內安全性評價：H&E染色分析
作者通過H&E染色（蘇木精-伊紅染色）結果顯示，與生理鹽水處理的對照組相比，各治療組（包括游離阿霉素和Dox-FA-GDNVs）在心臟、肝臟、脾臟、肺和腎臟中均未顯示出明顯的組織或細胞損傷跡象。具體而言，未觀察到心肌纖維化、心組織空泡化、肝細胞水腫、脾臟粒細胞增多、腎臟腎小管空泡化和腎小管擴張伴出血區域，以及肺組織肺泡壁增厚和細胞浸潤等病理變化。這些發現表明，葉酸修飾的GDNVs（FA-GDNVs）作為一種藥物遞送平臺，具有減少游離藥物毒性和不良反應的潛力。
文章小結
本研究作者開發了一種基于生姜衍生脂質的納米載體（GDNVs），用于阿霉素（Dox）的遞送以治療結腸癌。研究發現，GDNVs能被結腸癌細胞高效攝取，且在200 μmol/l濃度下表現出優異的生物相容性，相比之下，陽離子脂質體會抑制細胞增殖并增加細胞凋亡。GDNVs可高效負載Dox，負載效率高達95.9%±0.26%，且藥物釋放具有pH依賴性，能在腫瘤微環境中快速釋放藥物，減少正常組織毒性。通過葉酸修飾（FA-GDNVs），Dox可精準遞送至腫瘤部位，顯著增強化療效果。體內實驗表明，FA-GDNVs在小鼠體內循環48d后仍保持穩定，且通過非侵入性成像技術證實其具有主動靶向腫瘤的能力。抗腫瘤實驗中，Dox-FA-GDNVs顯著抑制了Colon-26腫瘤生長，效果優于游離Dox。免疫組化和TUNEL實驗進一步證實其抗腫瘤效果，而H&E染色分析顯示，FA-GDNVs未引起明顯組織或細胞損傷，具有良好的體內安全性。該研究展示了天然來源納米顆粒作為藥物遞送載體的潛力，有望減輕傳統合成納米顆粒的潛在問題，并為結腸癌治療提供新的策略。
當前位置：
